喜訊|深圳細胞谷聯(lián)合華中協(xié)和深圳醫(yī)院發(fā)表CAR-T治愈淋巴瘤案例報告
引言
2024年5月4日，華中科技大學協(xié)和深圳醫(yī)院血液內(nèi)科郭智教授團隊和深圳細胞谷王建勛教授團隊在《International Immunopharmacology》（國際免疫藥理學，中科院2區(qū)，IF 5.6）SCI期刊上聯(lián)合發(fā)表了題為“Rapid response in relapsed follicular lymphoma to novel anti-CD19 CAR-T therapy with pseudo-progression and cytomegalovirus infection A case report“的案例報告。本案例報告共同通訊作者為華中科技大學協(xié)和深圳醫(yī)院血液內(nèi)科郭智教授、劉黎瓊副主任醫(yī)師和深圳細胞谷首席科學家王建勛教授，共同第一作者為鐘楠主治醫(yī)師、深圳細胞谷馬啟宏助理研究員和龔詩婷助理研究員。
本案例展示了由深圳細胞谷生產(chǎn)的新型抗CD19 CAR-T成功救治了一例復發(fā)濾泡性淋巴瘤合并巨細胞病毒感染的患者，該末期淋巴癌患者在輸注CAR-T后完全緩解，截至目前已7個月仍未復發(fā)，認定為臨床治愈。
該案例證明了深圳細胞谷以逆轉(zhuǎn)錄病毒載體制備的新型靶向CD19 CAR-T細胞對于耐藥難治性濾泡淋巴瘤患者具有很好的療效，且安全性，有效性，治療反應(yīng)均符合預期。
深圳細胞谷致力于為研發(fā)做賦能，為臨床轉(zhuǎn)化提速度，為工業(yè)化降成本，為患者謀新生，讓好產(chǎn)品走出實驗室，真正做到研發(fā)服務(wù)于臨床，并應(yīng)用于臨床。目前深圳細胞谷與華中科技大學深圳協(xié)和醫(yī)院血液科緊密合作，已進行多例基于逆轉(zhuǎn)錄病毒載體制備的新型靶向CD19、BCMA、CD19/CD22 、CD7、CD38 CAR-T等新型CAR-T細胞的臨床治療，均顯示出較好的有效性和安全性。今后雙方將在CAR-T等細胞免疫治療產(chǎn)品的臨床研究上進一步強強合作。
深圳細胞谷提供安全性高、質(zhì)量好、價格低廉的GMP級逆轉(zhuǎn)錄病毒載體及細胞治療產(chǎn)品，確保細胞治療產(chǎn)品的安全性和有效性，推動細胞與基因治療行業(yè)的整體發(fā)展。
圖1 案例報告論文信息
（DOI: 10.1016/j.intimp.2024.112174）
案例報告介紹
本文摘取自案例報告，對新型抗CD19 CAR-T救治復發(fā)濾泡性淋巴瘤合并巨細胞病毒感染的患者病程進行簡單介紹。
一名40歲男性患者于2021年5月上旬無明顯誘因，劍突下腹部可觸及腫塊，堅韌無痛，無惡心、嘔吐、體重減輕等不適。經(jīng)過CT、腫瘤穿刺、免疫組化等多項檢查（圖2），患者被確診為淋巴瘤，淋巴造口系統(tǒng)腫瘤以濾泡性結(jié)構(gòu)為主，考慮濾泡性B細胞淋巴瘤，2級，3期，F(xiàn)LIPI評分2分。而后患者經(jīng)過多輪化療，病情稍好轉(zhuǎn)。2023年9月5日時，患者復查PET-CT(圖2B-b)提示腫瘤處于抑制狀態(tài)，治療后部分緩解（PR），但仍然殘留部分病灶，主治醫(yī)師決定對患者進行CAR-T治療。
圖2. CAR-T輸注前的PET-CT圖像及病理切片。(A) CAR-T輸注前腹部腫塊病理結(jié)果。a:蘇木精伊紅染色。b-e: Bcl-2陽性，Bcl-6陽性，CD21陽性，CD20陽性。(B)腹部初始診斷及有效治療的PET-CT影像時間。a:2021-5-26。b: 2021-12-14。(C)腹部復發(fā)PET-CT時間及免疫維持治療。a:2023-2-16。b: 2023-9-5。
憑借過硬的產(chǎn)品質(zhì)量，扎實高效的服務(wù)作風，頂尖的技術(shù)團隊和優(yōu)質(zhì)的企業(yè)信譽，深圳細胞谷順利中標華中科技大學協(xié)和深圳醫(yī)院“GMP級CAR-T細胞制備”項目。因此，本案例由深圳細胞谷提供基于逆轉(zhuǎn)錄病毒載體制備GMP級別新型靶向CD19 CAR-T細胞，該GMP級別CAR-T細胞陽性率52.9%，純度達100%，嚴格符合放行標準（圖3A、3C）。
圖3. CD19 CAR- T細胞的構(gòu)建及CD19 CAR- T細胞輸注方案。(A) CD19 CAR載體示意圖。(B) CAR-T輸注方案，F(xiàn)C用于淋巴細胞耗竭CAR-T細胞以3×106/kg的劑量輸注。(C) CD19 CAR-T細胞產(chǎn)品質(zhì)量。
該患者輸注前14天先進行淋巴細胞采集，經(jīng)氟達拉濱和環(huán)磷酰胺預處理方清除淋巴細胞后5天輸注CD19 CAR-T細胞50mL（3×106/kg）（圖3B）。輸注CAR-T兩天后，患者出現(xiàn)CRS 2級，雙側(cè)頸下淋巴結(jié)腫大，IL-6急劇升高，高熱(39.8°C)，且隨后又被檢測出巨細胞病毒感染。但經(jīng)對癥治療后，患者各項指標恢復至正常水平。經(jīng)臨床醫(yī)生評估，患者可出院在家療養(yǎng)，定期復查。
此外，我們檢測CD4+/CD8+T細胞的比例發(fā)現(xiàn)其在第60天下降后增加，而CAR拷貝數(shù)先增加后減少。我們推測，腫瘤可能在第60天左右復發(fā)，休眠的CAR-T細胞被激活，導致CAR拷貝數(shù)升高，細胞毒性CD8+ T細胞增殖并殺死腫瘤，第四個月PET-CT（圖5）提示患者已完全緩解（CR）。
該結(jié)果證明了深圳細胞谷基于逆轉(zhuǎn)錄病毒載體制備的靶向CD19 CAR-T細胞治療的安全性，有效性，治療反應(yīng)均符合預期。隨后患者長期隨訪，輸注7個月后在外周血中仍能檢測到CAR基因。此時靶向CAR-T細胞以記憶表型居多，一旦腫瘤有復發(fā)趨勢，CAR-T細胞仍能夠被激活，隨時監(jiān)控并持久清除腫瘤細胞，避免腫瘤進展。
圖4. CD19 CAR-T細胞輸注的臨床反應(yīng)及關(guān)鍵指標水平。(A) CAR-T輸注后患者體溫變化。第5天體溫升高至39.8℃，第8天體溫開始下降；(B) CAR-T細胞輸注后IL-6水平。IL-6在第5天達到高峰，第10天恢復正常；(C)患者CRP的變化。CRP在輸注后一周內(nèi)達到最高值(130.32 mg/L)；(D) WBC、Neut、Lymph、Mono的變化；(E) CD3+ T細胞內(nèi)CD4+/CD8+比值的變化；(E)流式細胞術(shù)檢測的CAR- t細胞擴增水平和qPCR檢測的CAR- DNA拷貝數(shù)。CAR-T和CAR- DNA拷貝數(shù)在輸注后呈波動下降，并在第15天達到峰值(CD3+ T細胞內(nèi)CAR-T:19.1%， CAR- DNA拷貝數(shù):532350拷貝/μg)。
圖5. 輸注后4個月PET-CT檢測
